Título

C-KIT IDENTIFICA UMA POPULAÇAO DE CELULAS-TRONCO ESPECIFICAS DO TECIDO RENAL DURANTE O DESENVOLVIMENTO, HOMEOSTASIA E REGENERAÇAO

Introdução

Recentemente, relatamos que células c-Kit isoladas de rins em desenvolvimento exibem potencial regenerativo em modelos de camundongo de síndrome nefrótica aguda e lesão de isquemia-reperfusão. Essas células já foram isoladas de doadores humanos falecidos. Nossa hipótese, portanto, é que as células c-Kit representam uma população-tronco específica do rim que está envolvida no desenvolvimento do rim e é mantida ao longo da vida adulta.

Material e Método

Cruzamos camundongos c-Kit reporter induzíveis (c-KitCreERT2/+) com camundongos IRG;mT, mG; LacZ; Confetti multicoloridos; BTBRob/ob. Variando o tempo de tratamento com tamoxifeno, as células c-Kit e seus descendentes foram especificamente marcados com proteína fluorescente verde (EGFP), LacZ ou fluorescência multicolorida. Assim, sua distribuição espaço-temporal foi acompanhada durante o desenvolvimento renal e lesão renal aguda (isquemia-reperfusão e rabdomiólise) e crônica (doença renal diabética [DRD]).

Resultados

A expressão do c-Kit foi mais abundante no período pós-natal inicial (P) (7,91 em P0,5-3,5; 10,6 em P7-14 vs 3,13 em embrionário [E] 17,5-18,5 (P<0,0001), e foi mantida ao longo da vida adulta, mas em níveis mais baixos (5,7 em P30 e 2,2 em P90-180). Quando o tamoxifeno foi injetado durante E7.5-9.5, algumas células EGFP/LacZ+ foram observadas em segmentos tubulares do córtex à medula, e em E10.5-12.5, quando o desenvolvimento de metanefros inicia, fitas de células c-Kit-EGFP/LacZ+ se expandiram para formar estruturas tubulares que se assemelhavam a corpos em forma de S. No período pós-natal, o número de células c-Kit-EGFP/LacZ/clonal multicolorida aumentadas no córtex, medula e papila, onde foram encontradas nos túbulos distais, ductos coletores e podócitos WT-1 positivos. Em camundongos adultos, essas células foram encontradas em segmentos distintos, incluindo a co-localização com calbindina-D28K e AQP2. Após lesão aguda, o número de clones c-Kit aumentou de 10 ± 3 para 36,5 ± 8 (P<0,0001) na medula externa. Na DRD, em média 21±3 glomérulos que exibem células c-Kit-EGFP nos camundongos BTBRob/ob (versus 12,2±2,2 glomérulos em camundongos heterozigotos; P=0,035) e também 2,43±0,3 células/glomérulos positivos c-Kit-EGFP (vs 1,6 ± 0,2; P=0,038), além da co-localização com alfa-actinina-4, PDGF, isolectina, THP, calbindina, NKCC2 e AQP2.

Discussão e Conclusões

Essas novas descobertas têm implicações importantes para o avanço da terapia celular para doenças renais agudas e crônicas e para o entendimento do desenvolvimento e da homeostasia renais.

Palavras Chave

células-tronco; desenvovlimento renal; lesão renal aguda, doença renal diabética

Área

Ciências básicas

Instituições

Hospital Albert Einstein - São Paulo - São Paulo - Brasil

Autores

Stephany Beyerstedt, Bruno Serrano, Marcella Franco, Barbara Seidler, Dieter Saur, Samirah A Gomes, Joshua M Hare, Érika B Rangel