Dados do Trabalho

Título

VALIDAÇAO DA PROVA CRUZADA POR CITOMETRIA DE FLUXO NA PLATAFORMA DXFLEX E ANALISE NO SOFTWARE KALUZA.

Introdução

A prova cruzada por citometria de fluxo (FCXM) Halifaster contribui para análises de risco imunológico pela alta sensibilidade na detecção de anticorpos doador específico (DSA). O objetivo do estudo foi a validação da FCXM utilizando o citômetro DxFlex, em correlação com a plataforma Canto II.

Material e Método

Foram realizadas 53 provas cruzadas, utilizando células de colaboradores e soros de receptores analisados pelo ensaio de fase sólida (Single Antigen One Lambda). Dentre estas, 20 testes foram realizados com soros de pacientes sensibilizados sem a presença de DSA, para estabelecimento do valor de corte. Os dados obtidos no DxFlex e Canto II foram analisados no Sofwtare Kaluza e reportados na escala X-MedBIN e FACsDIVA em 1024 Channel Scale, respectivamente.

Resultados

A precisão foi avaliada pela variação de MCF do controle negativo, com valores linfócitos T de 236,5±14,54 (CV6%) e linfócitos B de 281±22,82 (CV 8%). O valor de cutoff foi de 53 para linfócitos T e 76 para linfócitos B. A acurácia dos valores de Delta MCF foi de R²: 0,8853 (Linfócito T) e R²: 0,902 (Linfócito B), o que representa uma acurácia de 94,09% e 94,97%. A sensibilidade e especificidade foram de 96% e 95%, respectivamente. A reprodutibilidade intra e inter-ensaio para linfócitos T foi de <1,14% e 3,73%, para linfócitos B foi de 0,01% e 2,41%. O teste de carryover mostrou ausência de carreamento significante. Foram detectados 4 testes falso-positivos, porém com presença DSA em níveis intermediários e 1 teste falso negativo de linfócito B devido a interferência dos linfócitos B de memória.

Discussão e Conclusões

O excelente desempenho da metodologia terá impacto positivo na avaliação imunológica dos transplantes de órgãos sólidos em uma região do Brasil onde temos apenas disponibilidade do CDC e estimular outros laboratórios na implantação.

Palavras Chave

PROVA CRUZADA CITOMETRIA FLUXO D.S.A KALUZA