Dados do Trabalho

Título

NOVO ALELO HLA-A*02 COM CODON DE PARADA PRECOCE E EXPRESSAO NORMAL NA MEMBRANA IDENTIFICADO EM DOADORA VOLUNTARIA DE CELULAS TRONCO HEMATOPOIETICAS

Introdução

A investigação da expressão da molécula HLA é importante para a caraterização de alelos em que são identificados códons de parada, uma vez que eles nem sempre levam ao bloqueio da expressão da proteína.

Relato do Caso

Doadora voluntária de transplante de células tronco hematopoiéticas de 21 anos foi tipificada para cadastro no REDOME (Registro Brasileiro de Doadores de Medula Óssea). A tipificação foi realizada por sequenciamento de nova geração (Alltype FastPlex, One Lambda) e analisada com os softwares Type Stream Visual (One Lambda) e Twin (Omixon). O mesmo resultado foi obtido em dois laboratórios.

Resultados

Foi detectada uma mutação no alelo A*02:01:01:01, localizada no exon 7, códon 330, com alteração do códon CAG (aminoácido glutamina) para um códon de parada precoce (TAG). Para determinar se esta nova variante interfere na expressão da proteína HLA-A2, foi realizada a tipificação HLA por citotoxicidade dependente de complemento (Lambda Monoclonal Typing Tray, One Lambda) e a prova cruzada por citometria de fluxo com um soro com anticorpos contra a molécula HLA-A2. Ambos os testes revelaram expressão normal do HLA-A2 na superfície dos linfócitos T e B da doadora.

Discussão e Conclusões

O códon de parada precoce identificado no exon 7, que é responsável por codificar a cauda intracitoplasmática, não levou à alteração na expressão da molécula na superfície celular. É interessante que a mesma mutação já foi detectada nos alelos A*31:151Q e A*24:496, sugerindo que o códon 330 possa ser um ponto propício a mutações. Esta nova sequência está em processo de submissão à base de dados do IPD-IMGT/HLA. Este caso ilustra a importância da aplicação de estratégias combinando testes moleculares e celulares para analisar variantes alélicas com possível alteração de expressão.

Palavras Chave

HLA. Alelo nulo.