Dados do Trabalho

Título

EXPERIMENTOS DE ADSORÇAO/ELUIÇAO REVELAM QUE OS EPLETS 166DG E 166ES APRESENTAM REATIVIDADE CRUZADA

Introdução

IPermanece incerto se eplets distintos com propriedades físico-químicas similares apresentam reatividade cruzada.

Relato do Caso

O presente relato usou experimentos de adsorção/eluição (AE) para descrever dois eplets (166DG e 166ES) mostrando capacidade de adsorção mútua e reatividade cruzada. Uma paciente feminina apresentou reatividade contra diferentes CREGs no ensaio Luminex Single Antigen.

Resultados

A análise de epítopos, considerando TerEps e Eplets, mostrou que o padrão A1 CREG podia ser explicado tanto por epítopos verificados quanto crípticos. Para verificar a especificidade epitôpica, experimento de AE foi realizado com uma célula A*01:01. Observamos que todos os antígenos que compartilhavam o eplet 166DG foram recuperados no eluato (A1/A23/A*24:02/A80/B76; MFI médio=4641). Além disso, o eluato também recuperou os antígenos B44/B45/B82 (MFI médio=1341), que compartilham o eplet 166ES. Este achado inesperado nos levou a supor que as características dos aminoácidos nas posições 166 (ácido aspártico/D vs. ácido glutâmico/E) e 167 (glicina/G vs. serina/S) poderiam explicar o resultado do eluato. Assim, previmos que o eplet 166ES também poderia adsorver o anticorpo anti-166DG. Para validar essa hipótese, realizamos outro experimento de AE, usando uma célula B*44:03. Notavelmente, o eluato mostrou não apenas reatividade a B44/B45/B82 (MFI médio = 1952), mas também contra antígenos compartilhando o eplet 166DG (MFI médio = 2747). Descartamos a contaminação dos eluatos, pois os controles da terceira lavagem na AE foram claramente negativos.

Discussão e Conclusões

Nossos resultados de AE demonstram que os eplets 166DG/166ES apresentam reatividade cruzada. Este achado pode afetar significativamente a precisão da prova cruzada virtual e deve ser validada em outros ensaios baseados em células.

Palavras Chave

EPLETS com reação cruzada
Análise epítopos