Dados do Trabalho

Título

RINS EM ISQUEMIA FRIA APRESENTAM RESPOSTA INFLAMATORIA EX-VIVO RELACIONADA A CELULAS T, INTERFERON E RNAS NAO CODIFICANTES: UMA AVALIAÇAO MURINA E IN SILICO

Introdução

A isquemia fria (IF) é intrínseca à maioria dos transplantes realizados. Embora implicada em menor qualidade do enxerto renal, a explicação de tal mecanismo carece de dados. Nesse sentido, hipotetizamos que a IF provoca estresse celular ativando células imunes locais e lesão ex-vivo

Material e Método

Rins de camundongos C57BL/6 foram comparados a rins em solução Eurocollins à 4ºC por 24h e 30h. O dano renal foi acessado por H&E, e o estresse celular por lactato tecidual. Para avaliação imunológica, células CD45+CD4+ e CD45+CD4+TNF+ foram identificadas por citometria de fluxo, e a expressão de TNF e ICAM quantificada por PCR. Os resultados foram comparados a dataset de rins humanos in vivo ou após IF (GSE43974) e de células T in vitro cultivadas a 37ºC ou 4ºC (GSE62376). Foram considerados genes diferencialmente expressos quando FDR < 0.05 e log2FC >1. As vias relacionadas foram investigadas com Gene Set Enrichment Analysis considerando FDR < 0.05

Resultados

IF por 30h provocou dano tecidual e elevação de lactato local. À avaliação imunológica, houve redução de células vivas com aumento na frequência de CD45+CD4+ e CD45+CD4+TNF+ em tal período, bem como maior expressão de TNF e ICAM em 24h. Análise in silico comparativa identificou presença CD4, CD69 e de vias inflamatórias de IFN e adesão na IF humana, correlacionadas a upregulation de RNAs não codificantes (SNORD3A, SNORD3C, SNORD3D, SNORD13). Tais RNAs foram também mais expressos em células T in vitro à 4ºC comparativamente a 37ºC, correlacionados positivamente a IRF3 e STAT1

Discussão e Conclusões

IF causa dano tecidual e inflamação local per se, relacionada a células CD4, vias IFN e RNAs não codificantes. Como tais RNAs elevam-se também em células T à 4ºC correlacionados a IRF3-STAT1, acreditamos que tal via e célula contribuem na lesão por IF, configurando alvos para tratamento ex vivo

Palavras Chave

isquemia fria; RNAs não codificantes; transplante renal; interferon